期刊简介
本刊是以反映本校教学、科研和临床为主要内容的医药学类综合性学术刊物。报道基础医学、临床医学、药学、预防医学、中医(药)学及中西医结合基础与临床等方面最新研究成果和经验总结。适宜县级以上各级各类医务工作者、高等医药学院校师生及科研工作者阅读和参考。
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首页>河北医科大学学报杂志
- 杂志名称：河北医科大学学报杂志
- 主管单位：河北省教育厅
- 主办单位：河北医科大学
- 国际刊号：1007-3205
- 国内刊号：13-1209/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国科技核心期刊 1996年获河北省优秀期刊奖期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中)
结核分支杆菌分泌蛋白Mtb81在大肠杆菌中的高效表达
李香兰；吴雪琼；张广宇；李娟；张灵霞；梁建琴
关键词：分支杆菌, 结核, 大肠杆菌, 基因表达, 聚合酶链反应
摘要：目的通过结核分支杆菌Mtb81基因在大肠杆菌中的表达, 获得大量纯化的重组Mtb81蛋白.方法应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增结核分支杆菌H37Rv Mtb81DNA序列;将目的基因与pGEM-T连接, 转入E.coli-DH5a大量繁殖后,提取质粒DNA, 酶切鉴定、测序;构建pET24b-Mtb81重组质粒,然后转化入表达宿主大肠杆菌BL21(DE3); 诱导转化菌株,通过SDS-PAGE电泳鉴定Mtb81表达水平,采用His.band纯化 Mtb81蛋白.结果 pGEM-T/Mtb81内插入序列测序表明与报道的序列相同;pET24b-Mtb81在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的 30 % 左右,相对分子质量约 88 ku; 纯化后的Mtb81样品经SDS-PAGE和光密度扫描分析表明其纯度为 95 % 左右,从培养菌中可获得200 mg/L左右纯化的蛋白.结论 pET24b -Mtb81大肠杆菌工程菌株能高效表达Mtb81蛋白,大量纯化的Mtb81为进一步的研究、应用奠定了基础.
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